環境空氣質量正日益成為公共衛生領域的關鍵議題。在大氣中存在的各種病原體中,空氣傳播病毒由于能夠快速且隱秘地傳播,引發了人們的高度關注。這一事實凸顯了加強環境監測與檢測體系的必要性。
在此背景下,Coriolis Compact干式氣旋采樣器完美地滿足了這一需求。該設備不僅能夠收集微生物(病毒、細菌、真菌),還可捕集無機顆粒(過敏原、微塑料),從而可廣泛用于公共衛生監測領域。憑借其輕便緊湊的設計,Coriolis Compact可輕松攜帶至各類室內外重點區域進行空氣采樣。本應用說明主要聚焦于Coriolis Compact在病毒采樣方面的性能,該性能由獨立實驗室VirexpR通過實驗驗證得出。
?Coriolis Compact(型號 P002055-CORC0-A.0)采樣參數:50 L/min,采樣10分鐘
SARS-CoV-2病毒(奧密克戎BA5變異株)
實驗方法
在一個20 m3的測試艙中,均勻噴散固定濃度的體外合成病毒顆粒。隨后,使用Coriolis Compact對艙內空氣進行采樣。采集的樣本隨后分為兩條分析流程:
1.感染性分析流程 :a、將收集的病毒懸液進行系列稀釋后接種至8孔Vero E6易感細胞中。b、經過37°C培養96小時后,通過顯微鏡觀察細胞感染效應。c、計算出IC50值(感染50%細胞所需病毒量),并按采樣體積進行歸一化處理,得到TCID??/m3指標。
2.基因組分析流程:a、使用**Qiagen RNeasy Mini Kit(貨號74106)**提取病毒RNA。b、采用RT-qPCR檢測,針對SARS-CoV-2的**nsp14非結構蛋白(ORF1b-nsp14)**基因設計特異性引物與探針。c、在Applied Biosystems QuantStudio? 5實時定量PCR系統上分析樣品。d、將檢測到的基因拷貝數按采樣體積歸一化,得到copies/m3指標。
實驗流程
每個測試循環分為兩個階段(見下圖):
?階段1(對照采樣):在生成病毒氣溶膠之前,對測試艙空氣進行采樣,作為陰性對照。
階段2(病毒采樣):在艙內霧化噴散病毒后,經過均化階段,再使用Coriolis Compact進行采樣。采集的病毒樣本分別進行感染性分析和基因組拷貝數檢測(RT-qPCR)。
每個階段2實驗均進行三次重復試驗,病毒噴散濃度依次為:
[C/1000](低濃度);[C/100](中濃度);[C](高濃度)
采樣參數
50 L/min,10分鐘。

實驗結論
通過上述實驗流程,獲得了兩類定量結果:
1.感染性病毒粒子數量(感染性數據)以TCID??/m3表示,即每立方米空氣中足以感染50%細胞的病毒量。
2.總病毒數量(含活性與非活性)(基因組數據)以copies/m3表示,即每立方米空氣中檢測到的病毒基因組拷貝總數。
實驗結果顯示:
?所有濃度水平(包括極低濃度 [C/1000])均檢測到陽性結果(見下圖a、b)。
收集到的病毒總粒子數量與理論預期濃度高度接近,尤其在[C/100]條件下表現最為突出。
圖a顯示,即使在無收集液體的干式采樣條件下,Coriolis Compact仍可有效捕獲并維持病毒活性,且病毒存活量與噴散濃度呈正相關。

結 論
獨立實驗室VirexpR的測試結果充分證明:
Coriolis Compact具備在空氣中采樣并收集多種濃度下的SARS-CoV-2活性病毒顆粒及其基因組物質的能力。
這突顯了其干式氣旋采樣系統的高效性,非常適用于后續需進行基因組分析或感染性研究的項目。
同時,Coriolis Compact配備最長8小時電池續航,并兼容Coriolis Connect智能應用程序,可實現對病毒及其他微生物傳播的精確、可控、可靠監測,為研究特定環境下的病原體擴散提供了強有力的技術支持。
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